Bio-plex悬液芯片系统操作指南

2024年05月24日 10:12  点击:[]


1、MCV板介绍:MCV板是用于维护(( maintenancc)、校正(calibration)和校验(Validation)的操作板。大小与一股9%孔板相同,如下图所示:


左上角两小孔用于 Calibration(仪器校正),箭头所示的右边部分用于Validation(校验)。仪器的每一步操作在屏容上都有MCV板的黄色闪烁操作提示,则在进行操作前必须在闪烁部分加入MCV板上提示的试剂。


2、开机:

注意:如果没配HTF,在开机前必须确认鞘流液瓶的鞘流液已经允满(液位在上端出口下),废液瓶必须倾空,并确认两个瓶子与仪器连接完好。如果配有HTF的机器,必须检查鞘流液桶的模流液是否足够。


打开仪器电源,点击电脑桌面的 Bio-Plex Manager域租口,进入软件界面。


3、Start up和仪器预热(warm up):点击工具栏上的 Start up 按钮些,在弹出的窗口中孩照黄色闪烁提示将相应的试剂加入到MCV板中,如下图所示,点击该窗口下方的Enter/Retract Plate'健,弹出微孔板平台,将MCV板平放在平台上,再按Enter按诅,将MCV板推进仪器中,最后按OK按钮确定,开始进行Start up.

Start up结束后,点击工具栏上的—拨型,将MCV板取出,然后开龄进行仪器预热,点击工具栏上的一预热按钮。仪器开始门动预热。一般预热30min.


4、校正(Calibratc)。预热结束后进行仪器校正,点击工具栏上的校正按钮,屏幕弹出如下窗口:

输入用户名,选择Calibrate kit的批号(Control Number),CAL1和CAL2的批号在Calibrate kit的瓶子上都有显示,点击该窗口上的Add按钮将该数据输入电脑,如果已经输好,只需选择即可。注意:如果是Bio-Plex Manager 4.1或以下版木软件,在选择CAL2的 Control Number时要确定当次检测的灵敏度范围,选择 High RP1(高灵敏度,02-3200pg)或Low RPI(低灵敏度,1.95-32000pg)的Control Number.

如界是最新的Bio-Plex Manager 5.0版软件,则无需在Calibrate时选择灵敏度范围,而是在Run 界而直接选择。

按OK确定,屏幕弹出 MCV板提示窗口:

加入黄色闪烁所提示的试剂,然后将MCV板推入仪器,恢OK开始进行仪器校正。

注意:Calibrate kit中的试剂CAL1和CAL2在加入前必须从2-8℃恢复到室温,并进行漩涡泡合30秒以上才能使用,每孔加入5滴,DI水加入3.5mL.


5、创建和运行方法Protocol sctting 和l Run protocol:

点击工具栏的NewD按钮。屏D即打开方法编辑Protocol窗口,如下图所示:

Step1:输入方法的一般信息

Step 2:选择分析样木:


如上图所示,选择分析物后,按AddAlI将其移到选择栏中(Selected).

如限要增加分析物组合,点击Add Pancl按钮,弹出窗口:

输入该分析物组合名称。点击右边的Add按钮。弹出.上面的右边窗口。将新的 kin 上的微球编码输入Regioa栏,把该微球对出的检测物名称输入到Name中,如n要继续增加分析物,点击Auk continue控植,如果编辑结束,则点击Ad按钮。然后回到SelecI Analyte界面进行选择。

Step 3板格式化,必须对板中各空的分析样本进行规定。以便收器在读板中自动识别。点击FormatPlale后,如下图:

左上角为三个按钮分别为:自动全部重复编码,白动横向重复和自动纵向重复。致字框为规定复孔数目。例如,标准品有8个,要做2复孔,则复孔选择2,界标点击横向重复编码按钮。然后鼠标在屏桌所示的板上技标准品所加的位置进行拖动,如从AI孔拉到地孔,即可得到如上图的格式,对持检样本,对照和背景也同样操作,如果不傲复孔则复孔栏选1

Slep 4:物入标准品信息:如下图所示,

Stcp 5:物入对照样水信息(Control informalion)

如果当此实验有对愿样木,则该步必须进行编辑,如栗没有对熙样木,则该步骤可跳过,直接编辑 Step 6.如下图,选得分析物,输入对照样木的浓度和标释倍数即可。


6、结果分析:


7、系统管路清洗、关机:

如果第一块板读完还要读第二块板,则需要先点击工具栏的-

Wash between plate按钮,按熙

弹出窗口的提示在MCV板上加入相应的试剂,然后点OK开始清洗。

如果当天读板结束,要关机,则点击工具栏上的Shut down 按,仍按照屏幕提示进行操作,Shutdown结束后,激光关闭,先关闭电脑的 Bio-Plex Manager程序,然后关闭机器电源.


八、注意事项

1、每次操作:严格进行每次实验的Start up, Shut Down 和板问清洗Wash Betwcen Plates操作,以遁免鞘流系筑的管路堵塞。

2、经常注意鞘谎液瓶和废液瓶的液面,及时添加鞘流液和倒空废液。经常打开仪器的所有门观察是否漏液,如果漏液及时联系Bio-Rad工程师进行维修。

3、如果仪器预热后闲置4小时,则激光自动关闭,这时如朵要读板必须重新预热:如栗温度改变2度以上必须重新进行Calibration.

4、读板前的注意事项:

D检查滤板是否平整。

2U测平板待检孔是否充词 bufTer.3)平版在1100转室温摇床0秒.

4检查废液瓶是否倒空和勒流液瓶是否充满。


九、系统维护与保养

1、系统校验(Validation):每月做一次,仪器撒动后也必须进行校验,检查并验证系统的光学系统、鞘流流路系统、报告激光和分类激光系缆等。点击工具栏的校验按包@,在弹出的窗口中选择Validation kit的Control Number,和校验类型,一般选抒All,点击OK 确定,按照弹出的 MCV板提示,在MCV板中加入相应的试制,如下图:


Step 6:输入特检样本信息:

方法编辑结束后可点击工具栏上的保存技址,将方法保存到指定的文件夹中。

Step 7:运行方法:

将板进仪器中,点击屏幕nun Protocol孩钮,在该界面中选择每region 100beads和l5OuL样品大小,如果是 Bio-Plex Manager 5.0或一上版木,还需选择检测灵敏度(高灵敏度范围: 0.2-3200pgtml或低灵敏度范圜:1.95-32000pg'ml)。然后点击右上角的Start 按诅,屏幕则弹出要求是否自动保存结果,可选择该项,在继续弹出的窗口中选择运行结果要保存的文件夹,按OK后,则开始读板,读板过程如下图所示:




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