肺功能检测SOP
一、硬件设置
1.1 大鼠小鼠的实验设置切换
在大小鼠的实验之间切换时,除了更换相应的实验腔体外,还需要调整控制主机上信号发生器模块上的跳线。将信号发生器模块从主机上拆下来后,调整 J2 位置跳线,大鼠设置为 x8,小鼠设置为 x4。设置完成后重新装回主机,注意对准上下卡槽轻轻推入,并拧紧固定螺丝。
1.2 设置正压
使用阀门控制面板上标识有 Positive Pressure 的 8 档旋钮来设置所需要的压力。一般情况下,设置为50。通过观察 Inspiration 位置的 Pressure 显示器显示的数值,来确认新的压力值。压力值是会浮动的,所以显示在 5%以内都是可以接受的。
1.3 设置负压
使用阀门控制面板上标识有 Negative Pressure 的 8 档旋钮来设置所需要的压力。一般情况下,设置为50。通过观察 Expiration 位置的 Pressure 显示器显示的数值,来确认新的压力值。压力值是浮动的,所以显示在 5%以内都是可以接受的
1.4 设置吸气气流
确认阀门控制面板上的 FRC 阀门处于 Off 位置,将 Inspiration 阀门拨到 On 的位置。转动左下方Inspiration 旋钮,直到右侧 Inspiration 位置的 Flow 显示屏显示所需要的气体流速值。一般设定气体流速的指导原则是:使用 2-3 秒将动物肺部填满的速率(可以通过实参考预实验得到的实验数据)。当看到Inspiration 位置的 Flow 显示屏显示正确值时(参考值:大鼠豚鼠 5.0-7.0,小鼠 0.8),将阀门控制面板上的Inspiration 阀门拨到 Auto 位置。这样就完成吸气气流的设定了。
1.5 设置缓慢呼气气流
确认阀门控制面板上的 FRC 阀门处于 Off 位置,将 Slow Expiration 阀门拨到 On 的位置。转动左下方Expiration 的银色旋钮,直到右侧 Expiration 位置的 Flow 显示屏显示所需要的气体流速值。一般设定气体流速的指导原则是:在一定时间内能够尽可能地消耗尽实验动物的肺活量(VC),这时候的气体流速就是我们所要的。
二、采集软件设置
2. 1软件 Hardware Calibrate设置
2.1.1进入 FinePointe 软件点击 FinePointe 软件,首次登录需要创建新用户账户、密码(密码可以不设定),点击 OK 进入软件,可以看到上一步设置的 RC 系统出现在软件界面右边位置,确认所有阀门控制开关都处于 Auto 状态,点击 Calibrate 进入校准定标界面。
2.1.2进行 FRC Flow Calibrate
2.1.2.1 点击 FRC Flow 的 Calibration 按键 Flow 板卡的模式调为 DC 模式,用小一字螺丝刀旋转 Balance,使得电压值为 0,点击 Next(F8)进入下一步。
2.1.2.2 Flow 板卡切换为 DC Adj 模式,旋转 Zero 旋钮使得读数为 0,点击 Next(F8)进入下一步。
2.1.2.3 Flow 板卡保持为 DC Adj 模式,使用注射器注入(大鼠腔体 1mL,小鼠腔体 0.5mL)空气到腔体中,当波形出现时点击 Next(F8)→Accept→Finish(F2)完成 FRC Flow 的校准。
2.1.3 进行 Flow Calibrate
点击 Flow 的 Calibration 按键,Flow 板卡的模式保持为 DC Adj 模式,使用注射器注入(大鼠 10mL,小鼠 1mL)空气到腔体中,当波形出现时点击 Next(F8)→Accept→Finish 完成 Flow 的校准。
2.1.4 进行 High Flow Calibrate
点击 High Flow 的 Calibration 按键,Flow 板卡的模式保持为 DC Adj 模式,使用注射器注入(大鼠 60mL,小鼠 10mL)空气到腔体中,当波形出现时点击 Next(F8)→Accept→Finish(F2)完成 High Flow 的校准。
2.1.5 进行 Lung Pressure Calibrate
2.1.5.1 点击 Lung Pressure 的 Calibration 按键,阀门控制面板的 FRC 阀门调整为 OFF 状态,M Pressure 板卡的模式调为 DC 模式,确认调整 Balance 旋钮使得波形为 0,点击 Next(F8)进入下一步。
2.1.5.2 保持 FRC 阀门为 OFF 状态,当 0cm 水柱施加到传感器上(即不接任何压力),信号稳定后,点击 Next(F8)进入下一步 (这一步不用操作设备,直接点 Next)。
2.1.5.3 调整 FRC 阀门为 ON 状态(绿灯亮),校正水柱加水值 20cm 高度线位置,管子连着一个三通接头,中间孔连着注射器,三通头接入到腔体前端气孔上,当信号基线稳定时,打入注射器里的气体,并保持压住注射器,这时看到水柱上会有明显的气泡冒出,20cm 水柱压力即施加在传感器上,信号显示稳定后,点击 Next(F8)-Finish(F2)完成 Lung Pressure 校正。
2.1.6 完成 Calibrate
所有校正完成后,Calibrate 按键全部显示为绿色状态,建议每天开始进行实验前做一次定标,切换大、小鼠腔体后做一次定标
2.2 软件 Study 配置
2.2.1 创建新 Study
2.2.1.1在软件主界面新建 Study,在左侧右键点击 New Study→ PFT。或者在标题栏 Create Study Options里面选择相应的 Study 类型 PFT Study
2.2.1.2 在弹出界面中填入相应的信息。此处以大鼠作为例子,输入 Study Name,选中动物种类为 Rat,点击 Next 进入下一步
2.2.1.3 在弹出界面中填入相应的信息。保持 Wait to turn on Ventilator 为选择状态,使得在进入 RC 测试阶段时程序会等待手动操作打开内置呼吸机,点击 Finish 完成,得到新建的 Study。
2.2.1.4 双击打开设置好的 Study,系统会自动创建一个新的 Report。
2.2.2 创建新 Subject
在 Study 界面,点击 Study Options 中齿轮图标,弹出窗口中点击添加新实验对象 New Subject,把相应实验动物信息提前输入到系统当中。并且点击 New Group 可以对添加的实验动物进行分组。也可以直接在开始采集时逐个添加,到采集完再进行分组。
三、开始采集
4.1 采集前检查
在开始采集之前,将硬件设备恢复成采集状态,所有阀门控制全部拨到 Auto 状态,动物开好气管,接上插管放入腔体内。
4.2 开始采集
4.2.1 一切准备就绪,鼠标左键点击设置好的 Study 拖放到右边的 PFT 设备上,或者在 Study 中的 LaunchStation 中直接选中设置好的设备,开始进行实验。
4.2.2 在弹出窗口界面中,可以双击选择左下角 Subjects Without Data 框中提前设置好的实验动物,也可以手动输入动物 ID 和体重,点击 Create Subject 进行创建,由于下一步的 Calibrate 已经完成,这里不需要进行,直接点击 Finish,进入采集界面。
4.2.3 点击菜单栏 View 可以切换采集界面显示的详情,可以根据自己的使用情况进行选择。这里是选择切换第二种显示界面,点击圆形红色按键可以开始采集。
4.2.4 在实验界面左上角会提示下一步实验应该进行的操作,而右上角则是显示当前所处的实验状态以及时间显示。点击右上角状态栏(红框位置)区域,可以看到当前实验进展流程情况。在实验进行过程中,一般是默认按照正常流程进行。如果有需要,可以通过鼠标双击条目,点击 Apply 变更实验进度流程。
4.2.5 当实验 3 次 FRC、3 次 PV、3 次 FV 测试完成后将会进行 RC 测试,此时系统会处于等待状态,点击菜单栏小扳手按键,调出呼吸机设置界面,输入相应呼吸参数(Rate:一般大鼠 60,小鼠 140,其余参数按默认数值)后点击 OFF 红色按钮,使得变成 ON 绿色状态,然后点击 OK,启动呼吸机,再点击红色开始按键,开始 RC 测试。
4.3 完成采集实验结束时点击 File→End Session,在弹出界面勾选上实验动物,点击 Next 进行实验数据保存,回到Study 界面,将自动加载实验数据,双击下方已加载的数据条,可以进入查看每个实验对象在的全部实验原始数据。
五、软件 Report
5.1 创建新 Report
Study 界面中,左上角是生成的报告,点击 Create Report 可以创建新的 Report。
5.2 查看导出 Report
双击打开报告,可以查看报告中的图标和数据对比,点击 Report Options 下的黄色铅笔✏ 图标,可以对该报告的设置进行修改,包括对比的参数和对象等,点击工具栏 Data Options 下的 Excel 图标,将该报告直接导出为 Excel 格式文件保存。