实验前准备：配置 10% 封闭液；0.2% Triton X-100；
第一天：
1. 取普通洁净盖玻片于 75% 乙醇浸泡，无菌超净台内吹干，将玻片置于 6/12/24 孔板内，种入细胞培养液过夜，待细胞长至 30%~60% 满。
2. 按照特定的实验目的处理细胞后，吸尽培养液，用 2/1/0.5 ml PBS 洗两次，加入 1/0.5/0.25 ml 固定液，室温固定 15 min。
3. 去除固定液，用 PBS 润洗 3 次，每次 5 min，摇床轻摇。
4. 用 0.2% Triton X-100 室温通透 5 min，PBS 润洗 3 次，每次 5 min，摇床轻摇。
5. 用封闭液（2/1/0.5 ml/孔）封闭 60 min。
6. 吸去封闭液（勿洗），用一抗（1/0.5/0.25 ml/孔）作用 60 min 或 4 ℃ 过夜，摇床轻摇。
第二天：
7. 去除一抗，PBS 润洗 3 次，每次 5 min，摇床轻摇。
7. 弃 PBS，加入 1/0.5/0.25 ml/孔稀释的荧光二抗，室温避光孵育 40 min，摇床轻摇。
8. 回收荧光二抗，PBS 润洗 3 次，每次 5 min，摇床轻摇。
滴加 DAPI（200/100/50 μl/孔）避光孵育 5 min，PBS 润洗 4 次，每次 5 min，洗去多余的 DAPI。用滤纸吸干爬片上的液体，滴 1 滴抗荧光猝灭封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，避免气泡，使细胞接触封片液，荧光显微镜观察绿色荧光
